Содержание
Глава 15.11. Доклинические и клинические исследования биоаналогичного (биоподобного) лекарственного препарата рекомбинантного фолликулостимулирующего гормона
1. Краткий обзор
В данной главе представлены требования к проведению доклинических и клинических исследований для демонстрации подобия (сходства) 2 рекомбинантных препаратов, содержащих в качестве действующего вещества фолликулостимулирующий гормон человека (рчФСГ).
В разделе, посвященном проведению доклинических исследований, представлены рекомендации для изучения фармако-токсикологических характеристик препаратов. В разделе, посвященном клиническим исследованиям, содержатся указания для демонстрации подобия (сходства) фармакодинамических, фармакокинетических свойств, эффективности и безопасности 2 препаратов, содержащих в качестве действующего вещества фолликулостимулирующий гормон, а также по специфическим мерам управления рисками. Представлены критерии экстраполяции клинических данных на другие показания, утвержденные для оригинального (референтного) лекарственного препарата.
2. Введение
В регистрационное досье на вновь разработанный лекарственный препарат, содержащий в качестве действующего вещества рчФСГ и представляемый для регистрации как биоаналогичный (биоподобный) оригинальному (референтному) лекарственному препарату, зарегистрированному в государствах-членах, должны быть включены материалы, обосновывающие доказательства сходства (подобия) указанных препаратов.
Фолликулостимулирующий гормон (ФСГ) секретируется передней долей гипофиза и играет ключевую роль в регуляции репродуктивных функций женщин и мужчин. ФСГ является гетерогенным димерным гликопротеиновым гормоном, состоящим из 2 связанных между собой субъединиц. Альфа-субъединица, состоящая из 92 аминокислот, подобна субъединицам других гормонов, имеющих гликопротеиновое строение, а бета-субъединица, состоящая из 111 аминокислот, специфична только для ФСГ. Обе субъединицы содержат олигосахаридные структуры. В зависимости от строения и количества углеводных цепочек выделяют несколько изоформ ФСГ с различным содержанием остатков сиаловых кислот. Изоформы с высоким содержанием сиаловых кислот имеют больший период полувыведения. Для описания характеристик белка имеются физико-химические и биологические методы.
Рекомбинантный человеческий фолликулостимулирующий гормон (рчФСГ) используется при нарушении репродуктивных функций у женщин для стимуляции роста и развития фолликулов яичников и у мужчин для стимуляции и поддержания сперматогенеза. Препарат вводится подкожно или внутримышечно.
Самым частым побочным эффектом применения рчФСГ является развитие синдрома гиперстимуляции яичников (OHSS). Это жизнеугрожающее состояние характеризуется развитием тяжелых асцитов, гемоконцентрацией, повышенной коагуляцией, нарушением электролитного баланса и гипертрофией яичников. Большое число стимулированных фолликулов и высокие концентрации эстрадиола, выделяемого созревшими фолликулами, являются факторами риска для развития синдрома гиперстимуляции яичников.
Препараты рчФСГ обладают низкой иммуногенностью, до настоящего времени отсутствуют сообщения о выработке нейтрализующих антител в ответ на введение рчФСГ. При терапевтическом применении препаратов рчФСГ аллергические реакции наблюдались в 0,2 процента случаев и менее чем у 1 пациента на 10000 при введении 2 различных зарегистрированных препаратов рчФСГ. Местные реакции наблюдались более часто (у 3 процентов и у более чем 1 из 10 пациентов, принимавших 2 различных препарата рчФСГ).
3. Сфера применения
Настоящая препарат специфичная глава содержит доклинические и клинические требования к подтверждению биоаналогичности (биоподобия) 2 лекарственных препаратов, содержащих рчФСГ.
4. Связь с другими главами
В главах 15 – 15.2 содержатся общие указания по разработке биоаналогичных (биоподобных) лекарственных препаратов.
5. Доклинические исследования
Доклинические исследования должны быть сравнительными и проводиться перед началом клинических исследований. Основной целью доклинических исследований является выявление возможных различий фармакотоксикологических характеристик биоаналогичного (биоподобного) и оригинального (референтного) препаратов, а не оценка реакции на введение препарата как таковой. При этом выбор подхода (программа проведения и объем исследований) должен быть полностью обоснован в доклиническом обзоре (модуль 2.4 регистрационного досье).
Исследования фармакодинамики
Исследование in vitro
Сравнительные исследования in vitro проводятся для выявления возможных различий фармакодинамических свойств по способности связываться с рецептором и вызывать их активацию между биоаналогичным (биоподобным) и оригинальным (референтным) препаратами. Данные исследования могут быть проведены в рамках изучения биологической (специфической) активности при характеристике показателей качества препарата. Для реализации этой цели существует 2 основных подхода. При первом подходе в качестве клетки мишени используются зернистые (гранулезные) клетки или клетки Сертоли. При втором подходе создается постоянно культивируемая клеточная линия (например, на основе CHO), которая имеет стабильные трансфецированные рецепторы к рчФСГ. Преимущество первого подхода заключается в том, что изучение взаимодействия рчФСГ с рецептором осуществляется в условиях, максимально приближенных к естественным, а недостатком данного подхода является ограниченное число клеток тест-системы, что ограничивает количество повторов и использования различных разведений препаратов рчФСГ, которые необходимы для получения достоверных результатов оценки соотношения “концентрация – ответ”.
Второй подход позволяет получать в большом количестве материал для исследования, однако зависит от полученной искусственной клеточной конструкции (трансфецированных клеток). Должна быть показана соответствующая чувствительность биотеста, использованного для проверки сопоставимости и выявления потенциальных отличий. Эксперименты должны быть проведены с достаточным числом разведений на каждую кривую для полной характеристики соотношения взаимосвязи “концентрация – ответ”.
В исследованиях in vitro необходимо продемонстрировать способность связывания с рецептором, включая кинетику включения – выключения, а также результаты оценки активации рецепторов, т.е. продукции активатора плазминогена (только в классическом исследовании на первичных гранулезных клетках), или накопления внутриклеточного цАМФ. Возможны иные конечные точки (например, активация гена-репортера).
Должны быть представлены в регистрационное досье исследования связывания, включая кинетику включения – выключения, а также результаты оценки активации рецептора, т.е. выработки активатора плазминогена (только в классическом исследовании на первичных гранулезных клетках), или накопления внутриклеточного цАМФ. Заявитель вправе выбрать другие конечные точки (например, активацию гена-репортера). Заявитель должен обосновать выбранный подход в регистрационном досье.
Исследование in vivo
Рекомбинантный фолликулостимулирующий гормон является высоко-гликозилированным белком, и исследования в in vitro не могут в полной мере отразить свойства препарата, которые проявляются в естественных условиях. Таким образом, чтобы квалифицировать любые потенциальные различия между биоаналогичным (биоподобным) рчФСГ и оригинальным (референтным) препаратом, нужно рассмотреть потребность в дополнительных сравнительных исследованиях in vivo.
В настоящее время активность препаратов рчФСГ оценивается методом калибровки по международному стандарту (или внутреннему референтному стандарту, калиброванному относительно международного стандарта, метод Стилмана – Полея). Поскольку таким способом может быть оценена степень активности как биоаналогичного (биоподобного), так и оригинального (референтного) препарата, число различных проводимых анализов может быть уменьшено при помощи разработки исследования, в котором будут одновременно проведены сравнение биоаналогичного (биоподобного) и оригинального (референтного) лекарственных препаратов и их калибровка относительно референтного стандарта. Это позволит уменьшить вариабельность анализа и является более экономичным в отношении расхода реагентов и лабораторных животных. С помощью метода Стилмана – Полея можно установить биологическую активность, но он не позволяет выявить небольшие различия в степени активности между биоаналогичным (биоподобным) и оригинальным (референтным) препаратами. Оценка конечных точек безопасности например, масса тела и местная переносимость) может быть включена в рамки исследований фармакодинамических свойств in vivo.
Необходимо обосновать применение различных методов для сравнения плейотропных эффектов ФСГ в естественном тканевом окружении (например, исследования ex vivo с использованием культуры целых фолликулов или культуры клеток первичной гранулемы). Такой подход в последующем позволит сократить количество требуемых лабораторных животных, избежать вариабельности результатов, полученных при использовании животных, и представляет возможность оценить многие фармакодинамические показатели.
Токсикологические исследования
Проведение специальных исследований токсичности при многократном введении доз не требуется. В отдельных случаях, например, если в препарате используется новое вспомогательное вещество или вещество, которое плохо изучено, необходимо рассмотреть необходимость проведения дополнительных исследований токсичности.
При проведении доклинических исследований биоаналогичных (биоподобных) препаратов рчФСГ исследования фармакологической безопасности и репродуктивной токсичности не требуются. Оценка местной переносимости обычно не требуется. Однако если в состав препарата включены вспомогательные вещества, которые слабо изучены и для которых опыт применения с предполагаемым путем введения очень мал либо отсутствует, необходимо изучение местной переносимости. В данной ситуации оценку местной переносимости можно провести как часть других исследований in vivo.
6. Клинические исследования
Исследование фармакокинетики
Оценка фармакокинетических свойств биоаналогичного (биоподобного) и оригинального (референтного) препаратов проводится в 1 сравнительном перекрестном исследовании при подкожном введении 1 дозы препаратов на здоровых добровольцах женского пола. Для подготовки программы исследований рекомендуется учитывать требования правил проведения исследований биоэквивалентности воспроизведенных лекарственных препаратов Союза. При этом рекомендуется стимулировать подавление секреции эндогенного чФСГ, например, с помощью агониста гонадотропин-высвобождающего гормона или комбинированных пероральных противозачаточных средств. Доза препарата должна быть обоснована с учетом того, что определение различий между биоаналогичным (биоподобным) и оригинальным (референтным) препаратами возможно в линейной части кривой “доза – эффект”. Для оценки фармакокинетических свойств препарата необходимо использовать показатели AUC, Cmax, tmax, t1/2 и клиренса. 90 процентный доверительный интервал отношения показателей AUC и Cmax между оригинальным (референтным) и биоаналогичным (биоподобным) препаратами должен составлять от 80 до 125 процентов, за исключением случаев, когда обосновано использование иного интервала. Для представления данных о других параметрах целесообразно использовать методы описательной статистики. Если отсутствует особая необходимость, проведение отдельных фармакологических исследований с внутримышечным введением препаратов не требуется.
Исследование фармакодинамики
Изучение фармакодинамических свойств препарата должно быть проведено в рамках III фазы клинических исследований.
Исследование эффективности
Подобие (сходство) эффективности биоаналогичного (биоподобного) и оригинального (референтного) препаратов должно быть продемонстрировано в рандомизированном клиническом исследовании достаточной статистической мощности в параллельных группах. Оптимальной моделью для сравнительного изучения эффективности биоаналогичного (биоподобного) и оригинального (референтного) препаратов является стимуляция мультифолликулярного развития у пациенток, у которых ранее наблюдалась гиперовуляция в рамках таких вспомогательных репродуктивных технологий, как экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО), внутрифаллопиевый перенос гамет (GIFT) или внутрифаллопиевый перенос зиготы (ZIFT). Для сравнения эффективности необходимо использовать первый цикл лечения.
Рекомендуется проведение двойных слепых исследований. Если условия не позволяют проведение двойных слепых исследований, необходимо использовать ослепление на этапе оценки результатов. В первую очередь это касается результатов, на которые большое влияние оказывает субъективный фактор, например, ультразвуковые исследования и оценка состояния яйцеклетки и (или) эмбриона. Доза рчФСГ препарата должна быть фиксированной в течение первых 5 дней стимуляции. Допускается использование в протоколе агонистов или антагонистов гонадотропин-высвобождающего гормона.
В качестве первичной конечной точки рекомендуется использовать показатель количества зрелых яйцеклеток (ооцитов). Должна быть продемонстрирована эквивалентная эффективность исследуемого и стандартного препаратов и проспективно определены и подтверждены пределы эквивалентности. Диапазон эквивалентности должен быть определен проспективно. При этом необходимо учитывать, что и чрезмерная, и недостаточная стимуляция могут привести к задержке цикла и отсутствию зрелых яйцеклеток (нулевых ооцитов), которые являются основным показателем первичной конечной точки. Поэтому данные должны быть представлены таким образом, чтобы можно было провести детальное сравнение причин отмены циклов вспомогательных репродуктивных технологий.
В качестве альтернативного подхода для сравнительной оценки эффективности с использованием критерия не меньшей активности, может быть использован показатель нормального течения беременности в течение 10 недель после пересадки эмбриона, который может быть использован и в качестве первичной конечной точки. В данном случае показатель количества зрелых яйцеклеток (ооцитов) должен быть включен в качестве дополнительной первичной конечной точки с соответствующим диапазоном эквивалентности или в качестве наиболее важной вторичной конечной точки.
При определении вторичных конечных точек необходимо учесть следующие особенности:
если количество зрелых яйцеклеток (ооцитов) используется в качестве первичной конечной точки, то показатель нормального течения беременности в течение 10 недель после пересадки эмбриона должен рассматриваться в качестве вторичной конечной точки;
при искусственном оплодотворении доза рчФСГ подбирается на основании данных реакции яичников, что может скрывать различия, связанные с препаратами. Необходимо учитывать коррекцию дозы и возможные различия между дозами биоаналогичного (биоподобного) и оригинального (референтного) препаратов. При анализе вторичных конечных точек необходимо учитывать суммарную дозу препарата рчФСГ, количество дней стимуляции препаратом рчФСГ и процент пациентов, которым требовалось увеличение и уменьшение дозы препарата. Если основные различия между биоаналогичным (биоподобным) и оригинальным (референтным) препаратами касаются применяемой дозировки, то такие препараты не соответствуют концепции биоподобия;
следует изучать вспомогательные параметры, которые используются для демонстрации подобия (сходства) биоаналогичного (биоподобного) и оригинального (референтного) препаратов. Соответствующие конечные точки должны включать в себя количество фолликулов и их распределение по размерам во время лечения и в день индукции овуляции. Следующей конечной точкой, которая позволяет оценить фармакодинамические свойства препарата рчФСГ, является определение количества фолликулов после 5 дней стимуляции препаратом рчФСГ (перед проведением корректировки дозы). Кроме того, в сыворотке необходимо определить уровни ингибина-B, эстрадиола, лютеинизирующего гормона и прогестерона;
необходимо учитывать показатели, характеризующие качественные свойства зрелых яйцеклеток (эмбрионов), при этом необходимо документально фиксировать количество ооцитов (эмбрионов) хорошего качества.
Исследование безопасности
Изучения безопасности биоаналогичного (биоподобного) препарата в процессе исследования эффективности, как правило, бывает достаточно для характеристики профиля нежелательных реакций биоаналогичного (биоподобного) препарата. В первую очередь необходимо обратить внимание на синдром гиперстимуляции яичников и при развитии OHSS подробно описать все его проявления (например, степень тяжести – легкая, средняя и тяжелая) и дифференцировать синдром гиперстимуляции яичников с поздним и ранним началом.
Вероятность развития иммунной реакции на препарат чаще связана с подкожным путем введения и прерывистым (периодическим) введением препарата, чем с однократным внутривенным введением. Оба этих фактора могут применяться к рчФСГ, так как женщины могут получать более одного цикла вспомогательных репродуктивных технологий. Данные по иммуногенности должны представляться по всем женщинам, участвующим в исследовании эффективности, а также по всем женщинам, получающим более одного цикла вспомогательной репродуктивной терапии.
Определение иммуногенности нужно проводить до 3 месяцев после проведения терапии рчФСГ с применением валидированных тестов на основе антител достаточной чувствительности и специфичности. При обнаружении потенциального влияния антител к ФСГ на эффективность и (или) безопасность оно должно быть оценено и должна быть рассмотрена необходимость дальнейшей характеристики этих антител, например, в отношении их нейтрализующего потенциала.
7. Фармаконадзор
При регистрации препарата необходимо представить в модуль 1 регистрационного досье план управления рисками в соответствии с Правилами регистрации и экспертизы лекарственных средств для медицинского применения и надлежащей практикой фармаконадзора. В плане управления рисками биоаналогичного (биоподобного) препарата должны быть учтены выявленные и потенциальные риски, связанные с применением оригинального (референтного) препарата, и, если возможно, безопасность при показаниях, одобренных для оригинального (референтного) препарата, основываясь на экстраполяции данных. При этом план должен содержать детальное обсуждение, каким образом указанные проблемы будут устранены в пострегистрационном периоде.
8. Экстраполяция результатов исследований
Демонстрация эффективности и безопасности исследуемого препарата в сравнении с оригинальным (референтным) препаратом при стимуляции мультифолликулярного развития во время проведения вспомогательной репродуктивной терапии позволяет экстраполировать результаты исследования на другие показания, утвержденные для оригинального (референтного) препарата.